異物、微生物與熱原的防控策略

無菌制劑主要控制防止的污染物是異物、微生物與熱原，基于風險評估的結果，在不同的生產步驟和工藝中人、機、料、法、環等方面進行采取相關的控制策略，以下為個人總結生產過程中常用的控制異物、微生物與熱原方法。 

01

異物

異物是指玻璃、金屬、塵埃微粒、纖維、殘藥等。通過以下措施處理生產使用的器具、設備等從而降低產品異物的風險。

02

微生物

微生物是形體微小、構造簡單的生物的統稱。絕大多數個體用顯微鏡才能看到，廣泛分布在自然界中，如細菌、立克次體、支原體、衣原體、病毒、單細胞藻類、原生動物等。

消毒和滅菌是常用去除微生物的方法。消毒通常是指對環境中可能存在微生物的滅殺；滅菌，是對物料、器具等用于生產的小件物品的滅殺微生物的方式。  

常見的消毒方式有：臭氧、流通蒸汽、75%乙醇、季銨鹽消毒劑、紫外燈照射等。 
常見的滅菌方式有：干熱、濕熱、離子輻射、過氧化氫、環氧乙烷、除菌過濾等，滅菌后滅菌物品須達到無菌保證水平。 無菌保證水平（SAL）：指滅菌處理后單位產品上存在活微生物的概率。SAL通常表示為10^-n。如，設定SAL為10^-6，即經滅菌處理后在一百萬件物品中最多只允許有一件物品存在活微生物。

濕熱滅菌：配液系統SIP、凍干機SIP、器具蒸汽滅菌、潔凈服蒸汽滅菌、產品水浴滅菌、注射用水系統過熱水滅菌等。F0值：標準滅菌時間。滅菌過程賦予一個產品121℃下的等效滅菌時間。 根據被滅菌微生物污染水平和耐受濕熱的能力不同，濕熱滅菌程序通常劃分為過度殺滅法（F0≥12）和殘存概率法（F0≥8）（也稱生物負載法、適度殺滅法）。 

濕熱滅菌工藝監測的參數應當包括滅菌時間、溫度或壓力。 

干熱滅菌：西林瓶/安瓿瓶隧道烘箱干熱滅菌，干熱滅菌柜，烘箱等。FH是滅菌過程中滅菌對象接受的換算為參比溫度（170℃）后總滅菌時間，或稱標準溫度（170℃）下的等效時間。FH=△t×10（T-170）/Z  △t=滅菌時間T=實際滅菌溫度干熱滅菌Z=20℃除熱原Z=54℃。《中國藥典》中要求除熱原需滿足250℃，45min，即FH=1365。干熱滅菌時，滅菌柜腔室內的空氣應當循環保持正壓，阻止非無菌空氣進入。干熱滅菌用于過程中的溫度、時間和腔室內、外壓差應當有記錄。 離子輻照：無菌手套、呼吸袋離子輻照處理的。 過氧化氫：A/B級環境空間滅菌。 環氧乙烷：一直化學滅菌方法，僅在其他方法不適用情況下采用此法，對產品無破壞性影響，一般用于產品滅菌。 除菌過濾：產品無法通過滅菌工藝進行最終滅菌，應經過無菌的除菌級過濾器（至少0.22微米）進行除菌過濾。 通常，除菌級液體過濾器指在工藝條件下每平方厘米有效過濾面積可以截留10^7CFU的缺陷假單胞菌的過濾器。 除菌過濾器完整性檢測方法：起泡點、水浸入、擴散流/前進流、壓力保持/衰減。 

03

熱原

熱原，是引起患者發熱反應的物質。

內毒素：是熱原的一種，存在于細菌細胞壁中的致熱產物（例如脂多糖），導致患者發生反應發燒甚至死亡。 

大多數細菌和許多霉菌都能產生熱，致熱能力最強的是革蘭陰性桿菌的產物。微生物代謝產物中的內毒素是造成熱原反應的最主要因素。細菌內毒素耐熱性強，尺寸小，可通過一般濾器進入濾液中。除菌過濾不一定能夠除熱原！ 

除熱原的方法： 

① 活性炭吸附。0.1%~0.5%（溶液體積），煮沸并攪拌15min。 

② 離子交換法。熱原在水溶液中帶負電，可被陰樹指交換。 

③ 凝膠過濾法。利用熱原與藥物分子量的差異。 

④ 超濾法。孔徑為3~15nm。 

⑤ 強酸、強堿、強氧化劑。 

⑥ 高溫法。180℃，2h；250℃，30min。 

⑦ 蒸餾法。熱原的不揮發性，但熱原具有水溶性，所以蒸餾器要具有隔沫裝置，擋住霧滴的通過。 

⑧ 反滲透法。用醋酸纖維素膜和聚酰胺膜制備注射用水。 

注：生產過程中常使用注射用水清洗以降低內毒素限度。